快速光交聯(lián)的絲素蛋白水凝膠

來源： EngineeringForLife

通過雙酪氨酸鍵交聯(lián)的絲素蛋白水凝膠是透明的彈性結構，在再生醫(yī)學應用中具有巨大的潛力。在本研究中，證實了一種新的可見光介導的光氧化還原系統(tǒng)，用于絲素蛋白中雙酪氨酸鍵的形成，克服了目前傳統(tǒng)基于酶交聯(lián)的主要局限性。該系統(tǒng)可快速交聯(lián)絲素蛋白(<1 min)，使細胞以更高的細胞密度(1500萬個細胞/mL)包裹，同時保持較高的細胞存活率(>80%)。與酶促交聯(lián)過程中經(jīng)歷自發(fā)躍遷向較硬、富含β-sheet網(wǎng)絡轉(zhuǎn)換不同，光交聯(lián)的絲素水凝膠展現(xiàn)了更為穩(wěn)定的力學性能。這些水凝膠也支持人類關節(jié)軟骨細胞的長期培養(yǎng)，具有良好的軟骨組織形成。該系統(tǒng)還促成了在蛋白結構上沒有經(jīng)過化學修飾或流變添加劑的情況下，生物制造絲素蛋白的首次演示。應用這套光交聯(lián)系統(tǒng)，有著復雜、有序、漸變架構，且具有高精度（40 μm）的載細胞結構被打印了出來，這用傳統(tǒng)的酶促交聯(lián)系統(tǒng)并不能實現(xiàn)。綜上所述，這項工作顯示了一種新交聯(lián)方法的巨大潛力，這種方法可用于制造彈性絲素水凝膠，并可應用于生物制造和組織再生。

相關論文“Rapid Photocrosslinking of Silk Hydrogels with High Cell Density and Enhanced Shape Fidelity”發(fā)表于“Advanced Healthcare Materials”雜志，新西蘭奧塔哥大學KhoonS. Lim博士與澳大利亞新南威爾士大學Jelena Rnjak-Kovacina博士為共同通訊，第一作者為Xiaolin Cui。

圖1 兩種交聯(lián)方式：辣根過氧化物酶/過氧化氫（HRP/H2O2）酶促交聯(lián)，釕/過硫酸鈉（Ru/SPS）可見光交聯(lián)，通過形成雙酪氨酸鍵來構建絲素蛋白水凝膠的原理

圖2 絲素蛋白的性質(zhì)

圖3 載高細胞密度的人關節(jié)軟骨細胞（HACs）的絲素蛋白水凝膠長期培養(yǎng)結果

圖4 載HAC的光交聯(lián)絲素蛋白水凝膠的軟骨分化

圖5 對分泌的細胞外基質(zhì)（ECM）的免疫組織化學分析

圖6 絲素蛋白水凝膠中HAC的相關基因表達

圖7 用普朗尼克F-127做犧牲材料制備絲素蛋白水凝膠

圖8 用犧牲材料F-127 3D打印光交聯(lián)絲素蛋白水凝膠

論文鏈接：
https://onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1002/adhm.201901667